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    大容量低速冷凍離心機(jī)的實際運用分享

    更新時間:2021-09-15瀏覽:1747次

      大容量低速冷凍離心機(jī)結(jié)構(gòu)簡單、安裝方便、操作容易,能保持產(chǎn)品的晶粒形狀,采用彈性支撐結(jié)構(gòu),能減少由于不均勻負(fù)載引起的振動,其運轉(zhuǎn)平穩(wěn)。能實現(xiàn)密封,避免對物料的污染。
      下面咱們來了解下采用大容量低速冷凍離心機(jī)提染色體DNA,可直接應(yīng)用于常規(guī)的分子生物學(xué)實驗,包括PCR、限制性內(nèi)切酶的切割,以及基因組文庫的構(gòu)建的實際應(yīng)用:
      1、取1ml過夜培養(yǎng)菌液于8000g,離心機(jī)離心2min。去除培養(yǎng)基后,用400ulSTE緩沖液(100mMNaCl,10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)重懸菌體,按相同條件離心清洗菌體兩次。
      2、收集的菌體用200ulTE緩沖液(10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)懸起后加約50mg直徑425-600um規(guī)格的玻璃珠,再加入100ulTirs飽和苯酚。
      3、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩(細(xì)菌,振蕩60s;酵母,振蕩120s-200s),隨后于4℃,13000g,離心5min。
      4、吸取上層水相(約160ul)轉(zhuǎn)移至一個新的離心管中,加TE緩沖液補(bǔ)至200ul,再加入100ul氯仿混勻后,于4℃,13000g,離心5min。重復(fù)此步兩到三次。
      5、轉(zhuǎn)移上層水相(約160ul)至一個新的離心管中,補(bǔ)加40ulTE和5ulRNase(10mg/ml),37℃消化10min。
      6、加入100ul氯仿混勻于4℃,13000g,離心5min。
      7、轉(zhuǎn)移上層水相(約150ul)至一個新的離心管中。
      8、至此,上層水相即含有純化好的基因組DNA,可直接用于隨后的常規(guī)分子生物學(xué)實驗。
      希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。

     

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